Этап второй - «Приготовление препарата для его дальнейшего исследования»
И вот, наконец-то мы можем взять его и поразглядывать, но крышку снимать не спешим. Посмотрим какие у нас выросли колонии. Они могут быть крохотными, средними и большими, поверьте, вы поймете какого у вас размера колонии. Также они могут быть разных цветов, желтыми, белыми и оттенков этих цветов. И конечно разных форм, правда они скорее всего будут кругообразными. Некоторые могут принимать идеальную форму круга, некоторые нет, но мы не об этом. О качественном и количественном анализе посева воздуха методом Коха, мы, возможно, поговорим потом. А сейчас поспешим привести препарат в порядок. Предположим, что у нас несколько колоний и довольно больших размеров. Приготовим все необходимое из пункта оборудования Б. Приготовили. Зажигаем спиртовку. Протираем фильтровальной бумагой предметное стеклышко, выкидываем бумагу в кристаллизатор. Проносим стеклышко над пламенем спиртовки, что б убрать лишние микроорганизмы и ставим его на держатель стекол, который стоит на кристаллизаторе. Берем нашу микробиологическую петельку, фламбируем ее. Погружаем в воду, тем самым взяв капельку воду, которую мы кладем на стеклышко (1-2 капель воды будет достаточно). Снова фламбируем петельку. Открываем чашку Петри, откуда берем мазок нашего микроорганизма (стараемся снимать только его, не задевая ПС), втираем микроорганизм с петельки на капельку воду, не стесняемся втирать его и расширять «границы» капли, размазываем это пятнышко, что б оно было как можно более плоским, (переусердствовать не нужно, нам не понадобится огромное пятно, работаем в разумных пределах). Фламбируем петельку и отставляем в сторону. Теперь для дальнейшего исследования, необходимо зафиксировать препарат, делать мы это будем с помощью спиртовки. Предварительно просушиваем стеклышко на высоком расстоянии от пламени спиртовки, что б лишь его теплые пары касались стеклышка, нам нужно что б влаги на стекле не осталось, препарат должен быть сухим. После успешной или не очень сушки, мы должны его зафиксировать, для этого берем стеклышко так, что б пронести его через пламя спиртовки и не обжечься. Проносим его через пламя от 4 до 6 секунд.
–--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Примечание: В этих экспериментах спешить не стоит, лучше делать по максимальному времени
–--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Под наклоном 45 градусов, препаратом от спиртовки. Объект исследования зафиксирован. Дальше мы будем делать окрашивание препарата методом Грама. Это сложный метод окрашивания микроорганизмов, в котором присутствует несколько красителей, а микроорганизмы бывают Грам положительные и Гр-, подробнее о различии вы сможете узнать в интернете, а я лишь скажу, что Гр+ – фиолетового цвета, а Гр- – красного. Так вот, вернемся к самому процессу.
На предметное стеклышко, что находится на держателе, что над кристаллизатором, мы кладем крохотный вариант фильтровальной бумаги, так что б она накрыла собой микроорганизм, зафиксированный на стекле. Капаем пипеткой на эту бумажку генциан виолет, так что б вся поверхность бумаги была фиолетовой и оставляем это так на 1-2 минуты. По истечении времени снимаем бумагу, выкидываем в кристаллизатор. Капаем прямо на то что находится на стекле раствор люголя, оставляем на минуту. Затем капаем спирт и ждем 30-40 секунд. Как только время пройдет, мы ставим стеклышко под углом и поливаем водой, что б смыть спирт и красители. Сразу после этого мы ставим стеклышко на место и капаем на него фуксин, ждем еще 1-2 минуты. Снова смываем водой, промокнем фильтровальной бумагой (но не елозим ей по стеклу, аккуратно промокнули и выкинули бумагу в кристаллизатор) и кладем на держатель. Дальше мы капаем масло для объектива 90х на микроорганизм, так что б вся его поверхность была покрыта. И, переходим на третий этап.